液相(xiang)色(se)譜儀由(you)高壓(ya)液體(ti)泵、檢測器(qi)及(ji)液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)等三部(bu)分(fen)組(zu)成，其中(zhong)液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)的正確(que)安(an)裝和使(shi)用，是(shi)液相(xiang)色(se)譜工作的關鍵；也(ye)是(shi)液相(xiang)色(se)譜工作者(zhe)獲得正確(que)可(ke)靠的實(shi)驗數(shu)據(ju)的必(bi)經(jing)之(zhi)路(lu)。
壹、液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)的安(an)裝：
1、液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)的結構(gou)：
a、空(kong)柱(zhu)由(you)柱(zhu)接頭、柱(zhu)管(guan)及(ji)濾(lv)片組(zu)裝而(er)成。
柱(zhu)接頭采用低死體(ti)積結構(gou)，柱(zhu)接頭是(shi)兩(liang)端螺(luo)紋(wen)組(zu)件，壹端是(shi)為(wei)7/16英寸(cun)外螺(luo)紋(wen)，另(ling)壹端是(shi)3／16英寸(cun)的內(nei)螺(luo)紋(wen)(國內外已規(gui)範(fan)化(hua))。7／16英寸(cun)外螺(luo)紋(wen)與1／4英寸(cun)柱(zhu)管(guan)(Φ6.35mm)連(lian)接(jie)，中(zhong)間(jian)放置(zhi)壓壞(huai)用於密封(feng)。3／16英寸(cun)的內(nei)螺(luo)紋(wen)與1／16英寸(cun)(Φ1.57mm)的連(lian)接(jie)管(guan)連(lian)接(jie)，中(zhong)間(jian)也(ye)放置(zhi)壓環(huan)用於柱(zhu)接頭的(de)密封(feng)。為(wei)了盡量減(jian)少柱(zhu)外死體(ti)積，在安(an)裝色譜柱(zhu)時，用Φ1.57mm連(lian)接(jie)管(guan)通(tong)過空心(xin)螺(luo)釘(ding)壓環後(hou)要盡量插(cha)到(dao)底，然(ran)後(hou)再擰緊空心(xin)螺(luo)釘(ding)。壓環被(bei)空(kong)心(xin)螺釘(ding)擠壓變(bian)形(xing)後(hou)緊箍(gu)在連(lian)接(jie)管(guan)上(shang)(連(lian)接(jie)管(guan)通(tong)過壓環(huan)後(hou)露(lu)出的管(guan)長(chang)度應嚴(yan)格控(kong)制(zhi)在(zai)2．5mm長(chang)或(huo)其他固定尺(chi)寸(cun))。
在(zai)兩(liang)端柱(zhu)接頭內(nei)，柱(zhu)管(guan)兩(liang)端各(ge)放置(zhi)壹片不(bu)銹(xiu)鋼濾(lv)片(或(huo)濾(lv)網)，用於封(feng)堵(du)柱(zhu)填料(liao)不被(bei)流(liu)動(dong)相(xiang)沖出柱(zhu)外而(er)流(liu)失(shi)。空柱(zhu)各組(zu)件均(jun)為(wei)316#不銹鋼材質，能耐受(shou)壹般的溶(rong)劑(ji)作用。但由(you)於含(han)氯化(hua)物的溶(rong)劑(ji)對(dui)其有壹定的(de)腐蝕性(xing)，故(gu)使用時要註意(yi)，柱(zhu)及(ji)連(lian)接(jie)管(guan)內(nei)不能長(chang)時(shi)間(jian)存(cun)留(liu)此類(lei)溶劑(ji)，以避(bi)免(mian)腐蝕。
b、柱(zhu)填料(liao)：
液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)的分(fen)離(li)作用是(shi)在(zai)填料(liao)與流(liu)動(dong)相(xiang)之(zhi)間(jian)進行的(de)，柱(zhu)子的(de)分(fen)類(lei)是(shi)依(yi)據(ju)填料(liao)類(lei)型(xing)而(er)定。
正相(xiang)柱(zhu)：多以矽(gui)膠(jiao)為柱(zhu)填料(liao)。根據(ju)外型(xing)可(ke)分(fen)為(wei)無(wu)定型(xing)和球(qiu)型(xing)兩(liang)種(zhong)，其顆(ke)粒(li)直徑(jing)在3—10 µm的範圍內。另(ling)壹類(lei)正相(xiang)填(tian)料(liao)是(shi)矽(gui)膠(jiao)表面鍵合—CN，-NH2等(deng)官(guan)能團(tuan)即所謂(wei)的(de)鍵合相(xiang)矽(gui)膠(jiao)。
反(fan)相(xiang)柱(zhu)：主要是(shi)以(yi)矽(gui)膠(jiao)為基(ji)質(zhi)，在(zai)其表面鍵合十(shi)八(ba)烷(wan)基(ji)官(guan)能團(tuan)(ODS)的非極(ji)性(xing)填(tian)料(liao)。也(ye)有(you)無(wu)定型(xing)和球(qiu)型(xing)之(zhi)分(fen)。
常(chang)用的其他的反(fan)相(xiang)填(tian)料(liao)還(hai)有(you)鍵合C8、C4、C2、苯(ben)基(ji)等，其顆(ke)粒(li)粒(li)徑(jing)在3—10 µm之(zhi)間(jian)。
2，色(se)譜柱(zhu)的安(an)裝：
a、拆開(kai)柱(zhu)包裝盒(he)，確(que)認(ren)色(se)譜柱(zhu)的類(lei)型(xing)、尺(chi)寸(cun)、出廠日期(qi)以(yi)及(ji)柱(zhu)內貯(zhu)存(cun)的(de)溶(rong)劑(ji)。
b、擰下(xia)柱(zhu)兩(liang)端接(jie)頭的(de)密封(feng)堵(du)頭放回包裝盒(he)供備(bei)用。
c、按(an)柱(zhu)管(guan)上(shang)標示(shi)的流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)向(xiang)，將(jiang)色(se)譜柱(zhu)的入口(kou)端通(tong)過連(lian)接(jie)管(guan)與進樣(yang)閥出口(kou)相(xiang)連(lian)接(jie)(如(ru)條(tiao)件允許，建議(yi)在柱(zhu)前使用保護柱(zhu))；柱(zhu)的出口(kou)與檢測器(qi)連(lian)接(jie)。連(lian)接(jie)管(guan)是(shi)外(wai)徑(jing)為1.57mm、內徑(jing)為0.1-0.3mm的不銹鋼管(guan)。連(lian)接(jie)管(guan)的(de)兩(liang)端均(jun)有(you)空(kong)心螺釘(ding)及(ji)密封(feng)用壓環。在接(jie)管(guan)時(shi)壹定要設(she)法降(jiang)低柱(zhu)外死體(ti)積。連(lian)接(jie)管(guan)通(tong)過空心(xin)螺(luo)釘(ding)、壓環後(hou)盡(jin)量用力插(cha)到(dao)底，然(ran)後(hou)順時針(zhen)擰(ning)緊空心(xin)螺(luo)釘(ding)，直到擰不動(dong)為(wei)止(zhi)，再(zai)用扳手繼續順時(shi)針(zhen)擰1／4-1／2圈，切(qie)記不(bu)要用力過大。如(ru)色(se)譜柱(zhu)通(tong)過流(liu)動(dong)相(xiang)加(jia)壓(ya)後有(you)漏液現象，請用扳手繼續順時(shi)針(zhen)擰1／4圈，直至不漏液為止(zhi)。
二、液相(xiang)色(se)譜柱(zhu)的使用：
色譜柱(zhu)在使用前，最(zui)好進行柱(zhu)的性(xing)能測試(shi)，並(bing)將(jiang)結果(guo)保存起(qi)來(lai)，作為今後評(ping)價柱(zhu)性(xing)能變(bian)化(hua)的參(can)考。但(dan)要註意(yi)：柱(zhu)性(xing)能可(ke)能由(you)於所使(shi)用的樣(yang)品、流(liu)動(dong)相(xiang)、柱(zhu)溫等(deng)條(tiao)件的(de)差異(yi)而(er)有(you)所不(bu)同(tong)；另(ling)外，在(zai)做柱(zhu)性(xing)能測試(shi)時(shi)是(shi)按(an)照色譜柱(zhu)出廠報(bao)告中(zhong)的(de)條(tiao)件進行(出廠測試(shi)所使(shi)用的條件是(shi)最(zui)佳條件)，只(zhi)有(you)這(zhe)樣(yang)，測得的結果(guo)才(cai)有可(ke)比性(xing)。
1、樣(yang)品的(de)前處理(li)：
a、最(zui)好使用流(liu)動(dong)相(xiang)溶(rong)解(jie)樣(yang)品。
b、使(shi)用予處理(li)柱(zhu)除去(qu)樣(yang)品中(zhong)的(de)強(qiang)極(ji)性(xing)或(huo)與柱(zhu)填料(liao)產生(sheng)不(bu)可(ke)逆吸(xi)附(fu)的雜(za)質(zhi)。
、使(shi)用0.45µm的過濾(lv)膜過濾(lv)除去(qu)微粒(li)雜質。
2、流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)配(pei)制：
液相(xiang)色(se)譜是(shi)樣(yang)品組(zu)分(fen)在(zai)柱(zhu)填料(liao)與流(liu)動(dong)相(xiang)之(zhi)間(jian)質(zhi)量交(jiao)換(huan)而(er)達(da)到(dao)分(fen)離(li)的(de)目(mu)的(de)，因此(ci)要求(qiu)流(liu)動(dong)相(xiang)具(ju)備(bei)以下(xia)的(de)特(te)點：
a、流(liu)動(dong)相(xiang)對(dui)樣(yang)品具(ju)有(you)壹定的(de)溶(rong)解(jie)能力(li)，保證(zheng)樣(yang)品組(zu)分(fen)不(bu)會沈澱(dian)在柱(zhu)中(zhong)(或(huo)長(chang)時(shi)間(jian)保留(liu)在柱(zhu)中(zhong))。
b、流(liu)動(dong)相(xiang)具(ju)有(you)壹定惰(duo)性(xing)，與樣(yang)品不(bu)產(chan)生化(hua)學反(fan)應(特(te)殊(shu)情況除外(wai))。
c、流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)黏(nian)度要盡量小，以便(bian)在使(shi)用較長(chang)的(de)分(fen)析(xi)柱(zhu)時能得到好的分(fen)離(li)效果(guo)；同(tong)時降(jiang)低柱(zhu)壓降(jiang)，延長(chang)液體(ti)泵的使用壽命(可(ke)運用提(ti)高(gao)溫度的方(fang)法降(jiang)低流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)黏(nian)度)。
d、流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)物(wu)化(hua)性(xing)質(zhi)要與使(shi)用的檢測器(qi)相(xiang)適(shi)應。如(ru)使(shi)用UV檢測器(qi)，最(zui)好使用對(dui)紫外吸(xi)收(shou)較低的(de)溶劑(ji)配制(zhi)。
e、流(liu)動(dong)相(xiang)沸點不要太低，否則(ze)容(rong)易(yi)產(chan)生氣(qi)泡(pao)，導(dao)致(zhi)實(shi)驗無(wu)法進行。
f、在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)配(pei)制(zhi)好後(hou)，壹定要進行脫(tuo)氣。除(chu)去(qu)溶(rong)解在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)的(de)微量氣(qi)體(ti)既有利(li)於檢測，還(hai)可(ke)以防(fang)止(zhi)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)的(de)微量氧與樣(yang)品發(fa)生(sheng)作用。
3、流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)速(su)的選擇：
因柱(zhu)效是(shi)柱(zhu)中(zhong)流(liu)動(dong)相(xiang)線(xian)性(xing)流(liu)速(su)的函(han)數(shu)，使(shi)用不同的流(liu)速(su)可(ke)得到不同的(de)柱(zhu)效。對(dui)於壹根特(te)定的(de)色(se)譜柱(zhu)，要追求(qiu)最(zui)佳柱(zhu)效，最(zui)好使用最(zui)佳流(liu)速(su)。對(dui)內(nei)徑(jing)為4.6mm的色譜柱(zhu)，流(liu)速(su)壹般選擇1ml／min，對(dui)於內徑(jing)為4.0mm柱(zhu)，流(liu)速(su)0.8ml／min為佳。
當(dang)選用最(zui)佳流(liu)速(su)時，分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)可(ke)能延長(chang)。可(ke)采用改變流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)洗(xi)滌強(qiang)度的方(fang)法以縮短分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)(如(ru)使(shi)用反(fan)相(xiang)柱(zhu)時，可(ke)適當(dang)增(zeng)加甲醇或(huo)乙腈(jing)的(de)含(han)量)。
400-9268-001
