高效(xiao)液(ye)相色(se)譜儀(yi)的系(xi)統(tong)由儲(chu)液(ye)器(qi)、泵(beng)、進樣(yang)器、色(se)譜柱、檢(jian)測器(qi)、記錄(lu)儀(yi)等(deng)幾部(bu)分(fen)組成(cheng)。儲(chu)液(ye)器(qi)中的流(liu)動(dong)相被(bei)高壓泵打(da)入系統(tong)，樣(yang)品(pin)溶液經進樣(yang)器進入流(liu)動(dong)相，被(bei)流動(dong)相載入(ru)色(se)譜柱(固(gu)定(ding)相)內(nei)，由於(yu)樣(yang)品(pin)溶液中的各組分(fen)在(zai)兩(liang)相中具有(you)不同(tong)的分(fen)配系數(shu)，在(zai)兩(liang)相中做相對(dui)運(yun)動時，經(jing)過(guo)反(fan)復多次的吸附-解吸的分(fen)配過程，各組分(fen)在(zai)移動(dong)速度上(shang)產(chan)生較大的差別，被(bei)分(fen)離(li)成單(dan)個組分(fen)依次從(cong)柱內(nei)流出(chu)，通(tong)過檢(jian)測器(qi)時(shi)，樣(yang)品(pin)濃度被(bei)轉換(huan)成電信(xin)號(hao)傳送到(dao)記錄(lu)儀(yi)，數(shu)據(ju)以圖譜(pu)形式(shi)打(da)印出來(lai)。
高效(xiao)液(ye)相色(se)譜是目(mu)前應(ying)用最多的色(se)譜分(fen)析(xi)方法(fa)，高效(xiao)液(ye)相色(se)譜系(xi)統(tong)由流(liu)動相儲(chu)液(ye)體(ti)瓶(ping)、輸液泵、進樣(yang)器、色(se)譜柱、檢(jian)測器(qi)和(he)記錄(lu)器(qi)組成(cheng)，其整(zheng)體(ti)組成(cheng)類(lei)似(si)於(yu)氣(qi)相色(se)譜，但是針對(dui)其流(liu)動相為(wei)液體(ti)的特(te)點作出(chu)很(hen)多(duo)調整(zheng)。HPLC的輸液泵要(yao)求(qiu)輸液量恒(heng)定(ding)平(ping)穩;進樣(yang)系統(tong)要求(qiu)進樣(yang)便利(li)切(qie)換(huan)嚴密(mi);由於(yu)液體(ti)流(liu)動相粘(zhan)度遠遠高於(yu)氣(qi)體(ti)，為(wei)了減低柱壓高效(xiao)液(ye)相色(se)譜的色(se)譜柱壹般(ban)比較粗(cu)，長(chang)度也(ye)遠小於(yu)氣(qi)相色(se)譜柱。HPLC應(ying)用非(fei)常(chang)廣泛，幾乎(hu)遍及(ji)定(ding)量定(ding)性(xing)分(fen)析(xi)的各個領域(yu)。
高效(xiao)液(ye)相色(se)譜儀(yi)的特(te)性(xing)：
高壓--壓力可(ke)達150~300kg/cm。色(se)譜柱每米(mi)降壓為(wei)75kg/cm以上。
高速--流(liu)速為(wei)0.1~10.0mL/min。
高效(xiao)--塔板數可(ke)達5000/米。在(zai)壹根柱中同(tong)時(shi)分(fen)離(li)成份(fen)可(ke)達100種。
高靈(ling)敏(min)度--紫(zi)外檢(jian)測器(qi)靈(ling)敏(min)度可(ke)達0.01ng。同時消(xiao)耗樣(yang)品(pin)少。
HPLC與經典(dian)液(ye)相色(se)譜相比有(you)以下優(you)點:
速度快(kuai)--通(tong)常(chang)分(fen)析(xi)壹(yi)個樣(yang)品(pin)在(zai)15~30min，有(you)些(xie)樣(yang)品(pin)甚至在(zai)5min內(nei)即可(ke)完(wan)成(cheng)。
分(fen)辨率高--可(ke)選(xuan)擇(ze)固(gu)定(ding)相和流(liu)動(dong)相以達到最佳(jia)分(fen)離(li)效果(guo)。
靈敏(min)度高--紫(zi)外檢(jian)測器(qi)可(ke)達0.01ng，熒(ying)光(guang)和(he)電(dian)化(hua)學(xue)檢(jian)測器(qi)可(ke)達0.1pg。
色(se)譜柱可(ke)反(fan)復使(shi)用--用壹根色(se)譜柱可(ke)分(fen)離(li)不同(tong)的化(hua)合物(wu)。
樣(yang)品(pin)量少，容(rong)易(yi)回收(shou)--樣(yang)品(pin)經過色(se)譜柱後(hou)不被(bei)破(po)壞，可(ke)以收(shou)集單壹(yi)組分(fen)或做制(zhi)備。
