高效(xiao)液(ye)相色(se)譜儀是(shi)壹種基於色(se)譜技(ji)術的(de)分析(xi)儀器,具有高分(fen)離(li)能力、高靈(ling)敏度和(he)廣(guang)泛的(de)應用(yong)範圍。它(ta)在化(hua)學(xue)、生(sheng)物(wu)、制(zhi)藥(yao)、環境(jing)和(he)食(shi)品(pin)等(deng)領域中扮(ban)演(yan)著(zhe)重(zhong)要的(de)角(jiao)色(se)。基於液(ye)相色(se)譜技(ji)術,通(tong)過(guo)樣(yang)品在固定(ding)相上(shang)的分配(pei)和(he)吸(xi)附(fu)作(zuo)用(yong)來實(shi)現(xian)分(fen)離(li)。它(ta)利用(yong)高壓(ya)泵(beng)將(jiang)流(liu)動(dong)相(溶(rong)劑(ji))推(tui)動(dong)通(tong)過(guo)色(se)譜柱,樣(yang)品溶(rong)液(ye)通(tong)過(guo)柱(zhu)時(shi),不(bu)同成(cheng)分因為在固(gu)定(ding)相上(shang)的相互作(zuo)用(yong)力不同(tong)而(er)分(fen)離(li)出來。通(tong)過(guo)調(tiao)整流(liu)動(dong)相的(de)性(xing)質和(he)梯(ti)度條(tiao)件,可(ke)以(yi)實(shi)現(xian)對(dui)復(fu)雜(za)樣品的高(gao)效(xiao)分(fen)離。
1、柱(zhu)壓問(wen)題(ti)
壓(ya)力過(guo)高(gao):可(ke)能是(shi)由(you)於流(liu)路中(zhong)有堵塞(sai)。此(ci)時(shi)應分段(duan)進行(xing)檢查(zha),如斷開(kai)真空(kong)泵(beng)入(ru)口(kou)處、打(da)開(kai)Purge閥(fa)等(deng),以(yi)確定(ding)堵塞(sai)位(wei)置並進行(xing)處理(li)。
壓力過(guo)低(di):通(tong)常(chang)是(shi)由(you)於系(xi)統(tong)泄漏(lou)或泵(beng)內(nei)進了空氣。處理(li)方(fang)法(fa)包括尋找泄漏(lou)點並旋(xuan)緊(jin)、用(yong)專用(yong)針筒在(zai)排(pai)空(kong)閥(fa)處(chu)吸出氣泡(pao)等(deng)。
2、漂移(yi)問(wen)題(ti)
基線(xian)漂移(yi):可(ke)能由(you)柱溫波動(dong)、流(liu)通(tong)池汙(wu)染、紫(zi)外(wai)燈(deng)能量不足(zu)、流(liu)動(dong)相汙(wu)染或(huo)變質等(deng)原因引(yin)起(qi)。解(jie)決方(fang)法(fa)包括控制(zhi)好柱(zhu)子和(he)流(liu)動(dong)相的(de)溫度、用(yong)甲(jia)醇(chun)或(huo)其(qi)他強極性(xing)溶(rong)劑(ji)沖洗(xi)流(liu)通(tong)池、更換新的紫(zi)外(wai)燈(deng)、檢查(zha)流(liu)動(dong)相組(zu)成(cheng)等(deng)。
保留時(shi)間(jian)漂移(yi):溫控不(bu)當(dang)、流(liu)動(dong)相比(bi)例變化、色(se)譜柱沒(mei)有平(ping)衡、流(liu)速(su)變化、泵(beng)中(zhong)有氣泡(pao)等(deng)因素都可(ke)能導致保留時(shi)間(jian)漂移(yi)。解(jie)決方(fang)法(fa)包括調(tiao)好柱(zhu)溫、檢查(zha)四元泵(beng)的(de)比(bi)例閥(fa)是(shi)否有故障(zhang)、給予(yu)足(zu)夠的時(shi)間(jian)平(ping)衡色(se)譜柱、重(zhong)新設定(ding)流(liu)速(su)、從泵(beng)中(zhong)除去(qu)氣泡(pao)等(deng)。
3、峰形(xing)異(yi)常(chang)問題(ti)
色(se)譜圖(tu)中未出(chu)峰(feng)可(ke)能是(shi)由(you)於系(xi)統(tong)未進樣、樣(yang)品分解(jie)、泵(beng)未(wei)輸(shu)液(ye)或(huo)流(liu)動(dong)相使(shi)用(yong)不正(zheng)確等(deng)原因。解(jie)決方(fang)法(fa)是(shi)針對以(yi)上(shang)情況(kuang)成(cheng)因作(zuo)相應調整(zheng)。
出(chu)現(xian)負峰、寬峰(feng)、雙(shuang)峰或肩(jian)峰、前伸峰(feng)、拖(tuo)尾(wei)峰(feng)等(deng)問題(ti)時(shi),需(xu)要根(gen)據具體情況(kuang)分(fen)析(xi)原因並采取(qu)相應的解(jie)決措施,如調整(zheng)進樣量、樣品(pin)濃(nong)度、保護柱或(huo)色(se)譜柱的(de)狀態等(deng)。
4、色譜柱相關問題(ti)
篩板堵塞(sai):會(hui)導(dao)致(zhi)柱壓升高、色(se)譜峰拖(tuo)尾等(deng)問題(ti)。解(jie)決方(fang)法(fa)是(shi)分析(xi)樣品前(qian)先(xian)過(guo)濾(lv)或(huo)離(li)心,使用(yong)在線(xian)過(guo)濾(lv)器(qi)等(deng)。
強保(bao)留樣品組(zu)分(fen):會(hui)吸附在(zai)柱(zhu)頭填料上(shang),影響色譜柱壽命。解(jie)決方(fang)法(fa)是(shi)定(ding)期用(yong)強溶(rong)劑(ji)沖洗(xi)柱子。
裝(zhuang)填(tian)不(bu)良(liang):會導致柱效(xiao)突(tu)然降低(di)。解(jie)決方(fang)法(fa)是(shi)選擇(ze)填(tian)充(chong)良好的(de)色譜柱,並在(zai)低(di)柱壓(ya)下操(cao)作以(yi)減(jian)少損(sun)壞(huai)。